Evaluación funcional de dos cruzioseptinas de la secreción cutánea de la rana espléndida cruziohyla calcarifer

Abstract

El descubrimiento de nuevas moléculas como los péptidos antimicrobianos (AMPs) son de suma importancia para combatir el uso excesivo de antibióticos. Una de las fuentes más abundantes y estudiadas es la secreción cutánea de los anfibios con más de 1169 AMPs identificados. La especie Cruziohyla calcarifer forma parte de la familia Phyllomedusidae, de la cual se logró identificar 17 péptidos antimicrobianos denominados cruzioseptinas, que han demostrado una notable actividad antimicrobiana contra bacterias, hongos y parásitos. El objetivo de este trabajo de investigación es caracterizar funcionalmente a las cruzioseptinas (CZS-8 y CZS-13) considerando sus propiedades fisicoquímicas y cómo afectan a su mecanismo de acción y selectividad. Los péptidos CZS-8 y CZS-13 fueron sintetizados químicamente y purificados por medio de cromatografía de alta eficiencia (HPLC). Las fracciones purificadas fueron identificadas por medio de espectrometría de masas MALDI-TOF mediante la determinación de la masa molecular de cada uno de los péptidos. Se evaluó su actividad antimicrobiana por medio del ensayo de concentración inhibitoria mínima (CIM) y su actividad hemolítica. El péptido cruzioseptina-8 presentó una actividad inhibitoria significativa contra microorganismos como Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae a una concentración de 11,52 μM y contra Straphylococcus aureus a 23,02 μM y una actividad hemolítica en concentraciones > 23,02 μM, por otra parte, el péptido cruzioseptina-13 no presentó actividad antimicrobiana, pero si actividad hemolítica en concentraciones > 25,40 μM. Las propiedades fisicoquímicas como hidrofobicidad y cationicidad reflejaron mayor relevancia en la selectividad y actividad antibacteriana en comparación con la actividad hemolítica en la que influyen más la anfipaticidad e hidrofobicidad.