Evaluación de bioactividad de péptidos derivados de la piel de anfibios: enfoque in sílico e in vitro

Abstract

En esta investigación, presentamos un estudio computacional de tres péptidos aislados de las secreciones cutáneas de la piel de los anfibios de Cruziohyla calcarifer y Agalychnis spurelli. Experimentalmente, la secuencia aminoacídica se dilucidó en un estudio previo mediante clonación molecular y espectrometría de masas en tándem. Los péptidos fueron acoplados con receptores microbianos y cancerígenos claves mediante docking molecular. Adicionalmente se realizó dinámica molecular para cuantificar la interacción receptor-péptido utilizando MMGBSA y MMPBSA. Posteriormente, los péptidos fueron sintetizados en fase sólida y analizados contra los microorganismos E. coli, C. albicans, S. aureus y contra tres líneas celulares; A549, HFF y HEK 293T para determinar las propiedades antimicrobianas y anticancerígenas respectivamente. Además, se evaluó la toxicidad de los péptidos mediante ensayo de hemólisis. Los resultados bioinformáticos indicaron que AS1 fue el más prometedor debido a que presentó valores de enlace más bajos en las interacciones. Los ensayos MIC indicaron que AS1 es el único que presentó actividad antimicrobiana contra los tres microorganismos evaluados a una concentración de 256 y 512 mg/L. Aunque en los ensayos anticancerígenos todos los péptidos mostraron actividad significativa p<0.001 a 500 μM contra las tres líneas celulares, AS1 presentó los valores más bajos. Finalmente, en la evaluación de toxicidad el péptido AS1 fue el único que mostró toxicidad a 256 y 512 mg/L, indicando que es necesario buscar alternativas para disminuir la actividad hemolítica. Este estudio preliminar sugiere que AS1 fue identificado como un péptido candidato mediante las herramientas bioinformáticas, permitiendo la disminución de tiempo y costos.